人EB病毒衣殼抗原(EB.VCA)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理: 試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被EB病毒衣殼抗原IgA（EB.VCA IgA）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中EB病毒衣殼抗原IgA（EB.VCA IgA）的存在與否。

操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

人EB病毒衣殼抗原(EB.VCA)ELISA檢測(cè)試劑盒介紹：

【產(chǎn)品性狀】：96T/kit（12*8 strips）：可檢測(cè)90個(gè)樣本

             48T/kit (12*4 strips)：可檢測(cè)42個(gè)樣本

【產(chǎn)品特點(diǎn)】：靈敏性高，高效性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高。

【保存條件】：2-8℃，有效期為6個(gè)月

【檢測(cè)標(biāo)本】：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

【特異性】：本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

【使用范圍】：僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，不得用于臨床。

試劑盒組成及其配置：

一. 洗板問題

也許因素：

1) 選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。 

2) 選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，致使洗板不wan全；洗板針阻塞，抽吸不wan全；洗板不暢，致使洗板作用差。 

3) 反響板過多形成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。

解決辦法：

1) 確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選潔凈、無或少塵的吸水資料）上輕輕拍干； 

2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。

二、顯色

elisa試劑盒也許因素：

1) 顯色劑制造后放置時(shí)刻過長(zhǎng)或運(yùn)用過期顯色劑；

 2) 加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。

解決辦法： 

1) 顯色劑盡量在臨用前制造，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不可用； 

2) 加樣時(shí)堅(jiān)持顯色劑不外流； 

3) A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。

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