上海軒澤康生物有限公司為您提供科研elisa試劑盒，種屬標(biāo)本齊全，有zhuan門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、山羊、牛、豬、犬、雞、馬、猴、魚）、植物土壤以及藥殘類酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。

小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

關(guān)于血清樣本注意事項(xiàng)：

大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP未標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。

血清的采集、處理以及保存如下:

①    真空采集新鮮血液，加入無菌試管中；

②    采血后室溫靜置1小時；

③    將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10分鐘

④    取上清，分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時內(nèi)檢測存于2-8℃；1個月內(nèi)檢測存于-20℃；長期檢測可存于-80℃，可放置保存6個月）

備注：

1.      （96T/48T）打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全。

2.      標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：0、10、20、40、80、160 pg/mL

3. 樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測前準(zhǔn)備工作：

1.      請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2.      從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正常現(xiàn)象；放置室溫，輕搖均勻，待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液?？蓪?0ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

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