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禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒

簡要描述:禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUT OFF值相比較,從而判定標本中禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)的存在與否

  • 更新日期:2024-11-17
  • 訪  問  量:347

產(chǎn)品介紹

品牌軒澤康規(guī)格96T,48T
供貨周期現(xiàn)貨主要用途僅供科研
應用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥保質(zhì)期6個月
保存條件2-8℃檢測方法一步間接法
實驗儀器酶標儀樣本類型血清、血漿、細胞上清液等
特色服務(wù)免費代測

禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒實驗前的準備:

1) 確定試劑盒在有效期內(nèi)

2) 仔細閱讀說明書,按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)

3) 提前準備好所有實驗額外所需的設(shè)備(如離心機、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭、酶標儀等)

4) 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者注意低溫保存。根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量

5) 按說明書將所有試劑平衡至室溫,配制所需試劑。嚴格按照說明書進行實驗步驟。

檢測原理:試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被腦脊髓炎病毒(AEV)抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUT OFF值相比較,從而判定標本中禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)的存在與否。

樣品收集、處理及保存:

1.  細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

2.  細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。

3.  血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。

4.  血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

5.  體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。

6.  組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。

7.  樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-80 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒結(jié)果判斷

 1.  試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;

                陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性

4.  陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性


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